2018CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)學(xué)習(xí)班
時(shí)間：2018-06-23 08:00 至 2018-06-25 18:00
地點(diǎn)：上海
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2018CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)學(xué)習(xí)班 已截止報(bào)名會(huì)議時(shí)間： 2018-06-23 08:00至 2018-06-25 18:00結(jié)束 會(huì)議地點(diǎn)： 上海 浦東新區(qū)張江高科和信和泰酒店 科苑路866號(hào) 周邊酒店預(yù)訂 會(huì)議規(guī)模：50人 主辦單位： 上海遐永醫(yī)藥科技 |
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會(huì)議通知
會(huì)議內(nèi)容 主辦方介紹
2018CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)學(xué)習(xí)班宣傳圖
CRISPR/Cas9技術(shù)培訓(xùn)背景介紹：
CRISPR/Cas9?是細(xì)菌和古細(xì)菌在長期選擇壓力中形成的一種適應(yīng)性免疫防御，可用來有效抵御病毒及外源DNA的入侵。CRISPR的Type II已經(jīng)被廣泛用于基因工程，它包含Cas9，crRNA和tracrRNA，其中crRNA含有能夠識(shí)別20bp的靶向互補(bǔ)序列。Cas9，crRNA和tracrRNA組成復(fù)合體，識(shí)別并結(jié)合crRNA互補(bǔ)的序列，然后解開DNA雙鏈，Cas9中的HNH活性位點(diǎn)剪切crRNA的互補(bǔ)DNA鏈，RuvC活性位點(diǎn)剪切非互補(bǔ)鏈，最終導(dǎo)致DNA的雙鏈斷裂（DSB），進(jìn)而實(shí)現(xiàn)基因的敲除和插入。
目前，CRISPR/Cas9系統(tǒng)已經(jīng)廣泛用于對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞，細(xì)菌，斑馬魚，小鼠，豬，猴的基因編輯。本學(xué)習(xí)班將詳細(xì)講解CRISPR/Cas9基因編輯工具原理，操作流程，理論結(jié)合實(shí)踐，將讓大家詳細(xì)了解到具體如何利用CRISPR/Cas9技術(shù)構(gòu)建基因修飾動(dòng)物等。學(xué)習(xí)班將為相關(guān)科研工作人員和興趣愛好者提供了很好的培訓(xùn)資源。
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南京巴傲得生物科技有限公司(Biogottechnology,co,Ltd），是專一服務(wù)于生命科學(xué)研究的專業(yè)技術(shù)型企業(yè)。是一大批志同道合的資深專業(yè)人士共同創(chuàng)辦的具有現(xiàn)代化經(jīng)營管理水平的生物高科技企業(yè)，從事生物技術(shù)產(chǎn)品的開發(fā)及銷售，致力于將巴傲得生物打造成中國乃至世界一流的生物技術(shù)產(chǎn)品供應(yīng)商。巴傲得生物長期備有Bioworld抗體現(xiàn)貨4000多種抗體可以在一周左右送到客戶的手里。精湛品質(zhì)、合理價(jià)格、專業(yè)服務(wù)，是我們?yōu)槟?wù)的宗旨。在細(xì)胞信號(hào)通路、免疫學(xué)、蛋白組學(xué)上擁有顯著優(yōu)勢，其抗體產(chǎn)品、生長因子等為生命科學(xué)科研工作者提供了極大的便利。
會(huì)議日程
（最終日程以會(huì)議現(xiàn)場為準(zhǔn)）
第一天周六上午?9：00-12：00
1.?基因編輯技術(shù)原理
2.?基因編輯技術(shù)應(yīng)用
3.?三種基因編輯技術(shù)（ZFN、TALEN和CRISPR/Cas9）介紹
4.?其他類型的CRISPR核酸酶介紹（Cpf1, SaCas9,人工改造后的Cas9）
5.?CRISPR/Cas9常用載體介紹
6.?基因序列分析（請(qǐng)自帶可無線上網(wǎng)之筆記本電腦或手機(jī)，在線設(shè)計(jì)演練）
7.?設(shè)計(jì)gRNA的網(wǎng)站（在線設(shè)計(jì)演練）
8.?構(gòu)建gRNA表達(dá)載體（設(shè)計(jì)演練）
9.?PCR引物設(shè)計(jì)（設(shè)計(jì)演練）
?第一天周六下午?13：00-18：00
10.?基因敲除的方法（設(shè)計(jì)演練）
11.?基因敲入的方法（設(shè)計(jì)演練）
12.?檢測脫靶的方法
13.?提高CRISPR/Cas9特異性的方法
14.?CRISPR/Cas9導(dǎo)入細(xì)胞的方法
第二天?周日?上午?9:00-12:00
內(nèi)容
1, px330質(zhì)粒系統(tǒng)介紹。
2，sgRNA oligos模板退火方案。
3，退火gRNA與線性化CRISPR/Cas9載體連接詳細(xì)方案。
4，連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化到大腸桿菌（DH5α）。
5，轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂板培養(yǎng)。
6，鑒定插入oligo后的基因編輯質(zhì)粒ps330質(zhì)粒體系。
7，構(gòu)建同時(shí)敲除兩個(gè)基因的質(zhì)粒體系。
8，如何構(gòu)建CRISPR/Cpf1質(zhì)粒體系。
9，CRISPR/Cpf1質(zhì)粒體系鑒定。
第二天周日下午?13:00-18:00
1，Cas9的多功能系統(tǒng)（如Cut, Nick, Activate, dCas9-FokI）的詳細(xì)介紹。
2，利用CRISPR/Cas9構(gòu)建基因修飾小鼠方法介紹和實(shí)際操作方案
3，CRISPR/Cas9相關(guān)基因修飾小鼠模型介紹和操作方案
4，利用CRISPR/Cas9構(gòu)建基因修飾大動(dòng)物（豬、猴）方法介紹和實(shí)際操作方案
5，CRISPR/Cas9與基因修飾大動(dòng)物模型介紹和詳細(xì)操作方案
專題：利用CRISPR/Cas9技術(shù)編輯動(dòng)物細(xì)胞系
1，?CRISPR/Cas9質(zhì)粒細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法
2，?陽性細(xì)胞克隆篩選
3，?基因編輯細(xì)胞系的建立
4，?基因修飾情況分析方法
第三天?周一??上午9:00-12:00
1，?CRISPR/Cas9重組子細(xì)菌克隆挑取，擴(kuò)大化培養(yǎng)，鑒定，
2，?基因修飾基因組DNA模板（轉(zhuǎn)染CRISPR/Cas9到動(dòng)物細(xì)胞后提取DNA）制備
3，?目的靶基因的基因組DNA片段的PCR擴(kuò)增，電泳檢測PCR產(chǎn)物
4，?PCR產(chǎn)物退火變性，T7E1酶切，電泳鑒定基因修飾情況
專題：利用CRISPR/Cas9技術(shù)構(gòu)建基因敲除或敲入小鼠
1，基因編輯工具CRISPR/Cas9基本背景介紹
2，sgRNA設(shè)計(jì)及其功能驗(yàn)證
3，小鼠受精卵分離和培養(yǎng)
4，CRISPR/Cas9系統(tǒng)顯微注射到小鼠受精卵
5，受精卵顯微注射后回輸?shù)酱心甘篌w內(nèi)
6，PCR和T7E1分析和鑒定基因敲除小鼠（Founder）
7，基因敲除小鼠基因敲除情況分析
8，CRISPR/Cas9構(gòu)建基因敲除小鼠詳細(xì)實(shí)驗(yàn)流程歸納和總結(jié)
第三天?周一?下午13:00-15:00
專題：實(shí)驗(yàn)結(jié)果的點(diǎn)評(píng)與討論
1，?CRISPR/Cas9載體構(gòu)建討論
2，?目的靶基因的基因組DNA片段的PCR擴(kuò)增，電泳檢測PCR產(chǎn)物結(jié)果討論
3，?PCR產(chǎn)物T7E1酶切，電泳鑒定基因修飾情況結(jié)果討論
4，?Sanger測序鑒定基因編輯結(jié)果
1）?CRISPR/Cas9質(zhì)粒陽性轉(zhuǎn)化子測序結(jié)果確認(rèn)
2）?Sanger測序閱讀基因編輯情況
3）?如何從測序色譜圖中閱讀靶向突變等位基因型
專題：利用CRISPR/Cas9技術(shù)構(gòu)建基因修飾大型動(dòng)物（豬）
1，?利用CRISPR/Cas9構(gòu)建基因修飾大型動(dòng)物（豬）流程
2，?基因修飾大型動(dòng)物優(yōu)勢
3，?利用CRISPR/Cas9構(gòu)建基因修飾大動(dòng)物（豬）模型介紹
專題：CRISPR/Cas9脫靶問題分析
1，?脫靶產(chǎn)生的原因
2，?脫靶檢測方法
3，?降低脫靶問題的方法
專題：基因編輯工具拓展
1，?CRISPR/Cas9技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用
2，?新基因編輯工具Cpf1，C2C2的用法與比較
3，?基因編輯工具的倫理問題
4，?基因編輯工具的應(yīng)用拓展。
5，?根據(jù)學(xué)員的研究內(nèi)容，詳細(xì)答疑如何使用基因編輯工具。
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會(huì)議嘉賓
（最終出席嘉賓以會(huì)議現(xiàn)場為準(zhǔn)）
講師介紹：這次學(xué)習(xí)班我們邀請(qǐng)了兩位在基因編輯領(lǐng)域具有豐富實(shí)操經(jīng)驗(yàn)的教授作為主講人，通過三天的系統(tǒng)學(xué)習(xí)，能讓您熟悉并掌握基因編輯技術(shù)的核心知識(shí)點(diǎn)與詳細(xì)操作技巧。
第二天與第三天主講人：李博士
德國慕尼黑工業(yè)大學(xué)海歸博士，具有多年豐富的基因編輯實(shí)操經(jīng)驗(yàn)
參與德意志研究基金委項(xiàng)目(DFG)用于人類癌癥研究的轉(zhuǎn)基因克隆豬模型 (SCHN971/3-1)
?博士導(dǎo)師為原英國Roslin Institute克隆羊“多莉”團(tuán)隊(duì)的Prof. Dr. Angelika Schnieke
?成功構(gòu)建世界上第一頭ROSA26雙熒光豬模型，極具有生物醫(yī)學(xué)價(jià)值(已發(fā)表)。隨后，成功構(gòu)建Kras點(diǎn)突變基因修飾克隆豬模型，該模型為構(gòu)建胰腺癌大動(dòng)物模型提供了有力工具，為胰腺癌相關(guān)靶向藥物開發(fā)，尋找新的胰腺癌治療手段等提供了新的動(dòng)物模型。
第三天主講人：王永明教授
研究員，博士生導(dǎo)師，2015年國家青年千人獲得者。1997-2001年就讀蘭州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院并獲得學(xué)士學(xué)位，2001-2004年就讀東北師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院并獲得碩士學(xué)位，2005-2010年在德國馬克斯-德爾布呂克分子醫(yī)學(xué)中心（MDC）做博士生研究，并獲得柏林自由大學(xué)博士學(xué)位。2010-2013年在斯坦福大學(xué)醫(yī)學(xué)院從事博士后研究。2013年至今歷任復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院青年研究員、研究員。?
王永明博士于2010年在斯坦福大學(xué)醫(yī)學(xué)院做博士后研究，較早的開展了對(duì)基因編輯技術(shù)的研究和應(yīng)用，主要貢獻(xiàn)有1）首次把基因編輯技術(shù)用到了心血管領(lǐng)域，論文發(fā)表在Circulation Research上，被評(píng)為2012年度心臟領(lǐng)域最好的論文；2）首次用基因編輯技術(shù)制作了長QT綜合癥干細(xì)胞模型；3）發(fā)明了附著體CRISPR/Cas9技術(shù)，可以高效的敲除基因；4）發(fā)明了高通量測試gRNA效率的方法，篩選了5萬多個(gè)gRNA的活性。
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參會(huì)指南
會(huì)議內(nèi)容 場館介紹
【收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)】
注冊(cè)費(fèi)：3300元每位（注冊(cè)費(fèi)包含電子版教材、午餐，歡迎晚宴費(fèi)用，住宿費(fèi)自理。）
注意點(diǎn)：每人需要帶筆記本電腦！?
優(yōu)惠政策：
1. 提前20天確認(rèn)報(bào)名及轉(zhuǎn)賬的優(yōu)惠 100 元
2. 三人組團(tuán)報(bào)名，每人3100元
3. ?四人組團(tuán)報(bào)名，每人3000元，
4. ?五人組團(tuán)報(bào)名繳費(fèi)，額外帶一人免費(fèi)注冊(cè)！
可以開正規(guī)會(huì)務(wù)發(fā)票，紙質(zhì)邀請(qǐng)函（蓋紅章）。
?推薦下面三個(gè)基因編輯用的質(zhì)粒可以選擇訂購，每個(gè)質(zhì)粒800元，3個(gè)一起訂購按照600元一個(gè) （發(fā)票單獨(dú)開）??
1，ps330A-cas9-sgRNA（可插入任意20bp靶點(diǎn)序列）????? 2，ps330S-2-cas9-sgRNA（可用于同時(shí)敲除2個(gè)靶點(diǎn)的載體）????? 3，p-p53-cas9-GFP （可用于小鼠p53基因敲除的載體）
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溫馨提示
酒店與住宿:
為防止極端情況下活動(dòng)延期或取消，建議“異地客戶”與活動(dòng)家客服確認(rèn)參會(huì)信息后，再安排出行與住宿。
退款規(guī)則:
活動(dòng)各項(xiàng)資源需提前采購，購票后不支持退款，可以換人參加。
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